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RD蛋白的生物活性如何測(cè)量?

 更新時(shí)間:2024-04-08 點(diǎn)擊量:1562

RD蛋白的單位是以小瓶(µg或mg)的方式出售,具有特定的活性范圍。那RD蛋白的生物活性如何測(cè)量?

使用生物測(cè)定法,例如趨化性或細(xì)胞增殖測(cè)定法、酶測(cè)定法或功能ELISA,常規(guī)測(cè)量重組蛋白的生物活性。由于蛋白質(zhì)具有發(fā)揮多種生物活性的能力,對(duì)于特定蛋白質(zhì)可能存在幾種可接受的生物測(cè)定,并且?guī)追N不同的細(xì)胞類(lèi)型可能會(huì)做出反應(yīng)。不同的細(xì)胞類(lèi)型對(duì)特定蛋白質(zhì)具有不同的敏感性。因此,蛋白質(zhì)的活性與細(xì)胞類(lèi)型以及所采用的生物測(cè)定有關(guān)。

下圖表明,需要不同濃度的重組小鼠IL-6來(lái)誘導(dǎo)兩種不同細(xì)胞類(lèi)型的增殖。在生物測(cè)定中引發(fā)50%最大反應(yīng)所需的蛋白質(zhì)質(zhì)量稱為ED50。在這兩種常用的小鼠IL-6測(cè)定中,B9雜交瘤細(xì)胞系比T1165.85.2.1漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系的靈敏度高約100倍。因此,相同質(zhì)量的IL-6可以被分配為兩個(gè)不同的活性單位。

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每一批新的蛋白質(zhì)和每一組新的實(shí)驗(yàn)條件都應(yīng)該在滴定(劑量反應(yīng))實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行測(cè)試。這需要在建立新的實(shí)驗(yàn)或使用新的蛋白質(zhì)批次或來(lái)源時(shí)進(jìn)行。

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