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Elabscience Caspase 1活性檢測試劑盒的原理與注意事項

 更新時間:2023-12-21 點擊量:959

Elabscience®自主研發(fā)的 Caspase 1 Activity Assay Kit 采用分光光度法,可用于檢測細胞、組織裂解液或其它樣本的caspase 1活性。Caspase 1 也稱 interkeukin 1β conberting enzyme (ICE),是caspase 家族中唯yi可以剪切 IL-1β 前體蛋白或 IL-18 前體產生相應成熟的細胞因子的 caspase。那么你知道Elabscience Caspase 1活性檢測試劑盒的原理與注意事項嗎?讓我們一起來看看吧!

一、檢測原理

Elabscience Caspase 1活性檢測試劑盒是基于 caspase 1 可以催化底物Ac-YVAD-pNA 產生黃色的 pNA (p-nitroaniline),pNA 在 405nm 附近有強吸收,從而可以通過測定吸光度來檢測 caspase 1 的活性。

圖片1.png

二、保存條件

-20°C 可保存一年。Ac-YVAD-pNA (4 mM)應適當分裝并避光保存,避免反復凍融。

三、注意事項

1. 所有待檢樣本都需檢測蛋白濃度,由于樣本裂解液中含有還原劑,不適合使用 BCA 法進行蛋白濃度測定,推薦使用考馬斯亮藍法(Bradford 法)。

2. 建議在正式實驗前,選擇2~3個預期差異大的樣本進行預實驗,若樣本吸光值超過標準曲線的測量范圍,則需稀釋樣本或者調整上樣量再進行測定。

3. 進行caspase 1活性測定的樣本,其蛋白濃度應在1~4 mg/mL,否則會影響實驗結果的準確性。

4. 一次實驗的細胞數目建議不低于 1×106個,組織樣本不低于50mg,以便達到1~4 mg/mL的蛋白濃度。否則會影響實驗的精準度,導致蛋白濃度過低,反應體系內活性 caspase 1過少而OD值偏低。

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