国产熟女一区二区三区五月婷,日本人妻内射一区二区三区,欧美精品第56页在线播放,av一级一区二区三区

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)中心 > 一文了解Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色法

一文了解Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色法

 更新時(shí)間:2024-08-20 點(diǎn)擊量:2092

一、Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)結(jié)構(gòu)

考馬斯亮藍(lán)R-250G-250染料是二磺酸化三苯基甲烷化合物的兩種化學(xué)形式,結(jié)構(gòu)上R-250G-250少了2個(gè)甲基。命名上“R"Red的縮寫(xiě),因R-250的藍(lán)色染料呈微紅色;命名上“G"Green 的縮寫(xiě),因G-250的藍(lán)色染料泛淺綠色,也稱(chēng)為膠體考馬斯亮藍(lán)(見(jiàn)下文);“250"表示考馬斯亮藍(lán)的純度。

一文了解Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色法

其中R-250因少兩個(gè)甲基,與蛋白質(zhì)反應(yīng)比較緩慢,染色耗時(shí)較長(zhǎng),但是容易被洗脫下去,所以常用作凝膠電泳中蛋白質(zhì)條帶染色的基礎(chǔ)染料。而G-250因?yàn)槎鄡蓚€(gè)甲基,與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速,且形成有色復(fù)合體較為穩(wěn)定,不容易洗脫,常用于蛋白定量的Bradford 法測(cè)定試劑;也可染膠,但其脫色時(shí)間較長(zhǎng)、脫色困難,背景較高,長(zhǎng)時(shí)間在水中脫色容易使凝膠吸水膨脹甚至破碎。

二、Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色蛋白質(zhì)染料要求

用染料和生物大分子結(jié)合形成有色的復(fù)合物是電泳后檢測(cè)的方法。選用染料通常應(yīng)考慮以下要求:
1. 必須與大分子結(jié)合以形成一個(gè)不溶性的,有色的,緊密的復(fù)合物,但不結(jié)合到凝膠中和支持膜上,以便從凝膠中除去,否則高背景會(huì)影響蛋白帶的辨別和定量掃描。
2. 染料必須容易溶解在對(duì)大分子沒(méi)有影響的溶劑中,以利于背景的脫色。
3. 選用高吸光系數(shù)的染料有利于提高定量測(cè)定的靈敏度。
4. 選用能與大分子有專(zhuān)一性結(jié)合的染料,并在結(jié)合后能產(chǎn)生不同的顏色(如熒光),可以提高檢測(cè)的選擇性和靈敏度。

早期用于蛋白染色的染料是氨基黑10B,是一種含有兩個(gè)磺酸基團(tuán)的酸性重氮化合物,所以能與堿性氨基酸殘基結(jié)合進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)染色。但其對(duì)SDS-蛋白質(zhì)染色效果不好;此外,氨基黑10B對(duì)不同蛋白質(zhì)染色時(shí),著色度不等、色調(diào)不一(有藍(lán)、黑、棕等);染色靈敏度低,進(jìn)行凝膠定量掃描時(shí),誤差較大。 考馬斯亮藍(lán)染料是二磺酸化三苯基甲烷化合物,每個(gè)分子也含有兩個(gè)磺酸基團(tuán),也能與堿性氨基酸殘基結(jié)合進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)染色,其次,還可通過(guò)染料的疏水性殘基和蛋白質(zhì)的疏水性區(qū)域的作用產(chǎn)生疏水性力,同時(shí)也存在氧鍵和范德華力的作用??捡R斯亮藍(lán)染色靈敏度比氨基黑高5倍, 并且適用于SDS-PAGE電泳微量蛋白質(zhì)染色,此外與不同蛋白結(jié)合呈現(xiàn)基本相同的顏色,并且在比較寬的范圍內(nèi) ,掃描峰的面積與蛋白量有線性關(guān)系。

三、Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色考染的應(yīng)用

考馬斯亮藍(lán)又稱(chēng)為Bradford法,是一種常用的蛋白定性定量分析方法。其主要利用Coomassie Brilliant Blue G-250這種酸性染料與蛋白質(zhì)在酸性環(huán)境下產(chǎn)生吸附,導(dǎo)致染料的最大吸光波長(zhǎng)從465 nm變?yōu)?/span>595 nm。通過(guò)制備不同濃度的牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品液,Bradford試劑混合后測(cè)定其595 nm吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。與標(biāo)準(zhǔn)品同量的樣品蛋白溶液與Bradford試劑混合。5 min后在595 nm波長(zhǎng)下測(cè)定各樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出各樣品的蛋白濃度。

此外,考馬斯亮藍(lán)(Coomassie Brilliant Blue)與麗春紅染色一樣,也是WB實(shí)驗(yàn)中常用的染色方法。通常情況下考馬斯亮藍(lán)用于染SDS-PAGE凝膠以評(píng)估電泳和轉(zhuǎn)膜條件是否合適(在電泳完成后染色可以根據(jù)凝膠上條帶的位置形狀初步判斷蛋白的遷移情況;在電轉(zhuǎn)完成后進(jìn)行該染色可初步判斷蛋白是否有殘留,幫助實(shí)驗(yàn)人員判斷轉(zhuǎn)膜條件是否合適),而麗春紅染色則主要用于染膜以初步評(píng)估轉(zhuǎn)膜效率及不同組間蛋白表達(dá)情況。

一文了解Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色法

四、Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)染色步驟

1)電泳結(jié)束后,將膠板取出放入加有超純水的平皿中潤(rùn)洗,以去除殘留電泳液。

2)之后加入考馬斯亮藍(lán)染液浸沒(méi),放至水平搖床室溫30 min或更長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行染色(具體根據(jù)凝膠厚度和溫度進(jìn)行調(diào)整),直至凝膠與染色液顏色十分接近。

3)棄去染色液或回收染色液(可回收使用3次左右)。

4)脫色直至背景清晰。

五、Solarbio索萊寶WB-考馬斯亮藍(lán)部分產(chǎn)品表

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

P1305

考馬斯亮藍(lán)染色套裝

1Kit

更多有關(guān)索萊寶產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系索萊寶代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司!




国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 国产成人精品免费视频大全办公室-亚洲欧美日本综合在线| 性色国产成人久久久精品二区三区-偷窥中国美女洗澡视频| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 中文字幕偷拍亚洲九色-亚洲视频不卡一区二区天堂| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 夜夜久久国产精品亚州av-欧美大屁股一区二区三区| 欧美一级一线在线观看-亚洲一区二区亚洲三区| 亚洲一区二区免费av-中文字幕人妻久久久一区二区三区| 国产人妻人伦精品日本-国产98超碰人人做人人爱| 日本亚洲精品中字幕日产2020-很黄很黄的裸交视频网站| 丝袜美腿人妻连续中出-在线观看日韩三级视频| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 日本中文字幕啊啊啊啊-久久精品伊人久久精品伊人| 色综合色综合久久综合频道-埃及艳后黄版在线观看| 国产精品成人欧美激情-黄色床上完整版高清无遮挡| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 久久99热这里都是精品啊-国产成人亚洲精品无码aV| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 日韩欧美国产综合久久-国产精品一起草在线观看| 久艹在线观看视频免费-人妻偷人精品一区二区三区| 中文字幕偷拍亚洲九色-亚洲视频不卡一区二区天堂| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 中文字幕日韩精品不卡在线一区-国产tv日韩在线观看视频| 91精品国产影片一区二区三区-欧美精品久久久精品一区二区| 亚洲欧美日韩国产一区二区三区-国产欧美日韩一区二区免费| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 天天日天天干天天综合-99久久综合狠狠综合久久| 一区二区国产高清在线-日本高清无卡一区二区三区| 亚洲区欧美区在线视频-亚洲碰碰人人AV熟女天堂| 五月婷婷免费观看视频-男人操女人下面视频在线免费看| 国产小黄片高清在线观看-涩涩鲁精品亚洲一区二区| 国语自产偷拍精品视频偷拍-国产伊人这里只有精品视频| 午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 男女做爰猛烈啪啪吃奶在线观看-人妻连裤丝袜中文字幕| 四虎成人在线免费视频-亚洲熟女中文字幕天堂| 亚洲精品在线观看一二三区-在线观看国产中文字幕视频| 熟妇勾子乱一区二区三区-欧美爱爱视频一区二区| 日韩亚洲欧美综合在线-成人在线网站在线观看| 亚洲欧美一区二区中文-台湾中文综合网妹子网|